+ 375 17 283 17 38

+ 375 17 283 17 38

RU EN   

Экспериментальное применение спагириков в микробиологии и гигиене

Экспериментальное применение спагириков в микробиологии и гигиене

Эффективность воздействия в исследованиях in vitro некоторых натуральных растительных препаратов на возбудителях (Клебсиелла пневмониэ, Ацинетобактер) штаммов с характеристиками мультиустойчивости к антибиотикам

Апрель 2015, Бари. Италия Rapporteur:

Chiar.mo Prof. Antonio ROSATO Chiar.mo Prof. Giuseppe FRACCHIOLLA Graduate: Simona SERRATI

Цель исследования

В исследованиях in vitro производилась оценка антимикробной активности некоторых коммерческих продуктов фитотерапии, в частности, против бактериальных штаммов, с отмеченными характеристиками лекарственной устойчивости к антибиотикам. Эксперимент проводился с использованием метода минимальной ингибирующей концентрации (MIC).

Применяемые методы для проведения исследований

Минимальные ингибирующие концентрации (MIC). Минимальные бактериальные концентрации 1 (MBC) растительных препаратов а так же бактериальные субстанции, были представлены производственной компанией Erbenobili Srl Corato (BA).

Использовалась 96-ти луночная плата Microtiter® вместимостью каждой лунки 200 кl. Каждый продукт растворялся двойным разведением с производством посева микрофлорой в отдельных лунках. 1: Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI) M7-A6

Микроразведения

Берется 200 L и депонируется в первом столбце. Во второй ряд помещается 100 мкл. раствора.

Процесс разведения. Берется 100  кL из первой колонки и размещается во второй колонке.

 Из второй колонки берется 100  кL размещается в третьей колонке, затем из третьей в четвертую и т.д., что бы в каждой было всего по 100 мкл. Preparation of the plate Microtiter® Microtiter Plate ®Microtiter Plate ® 200 µl

Этот метод использует окончательное накопление исследуемого раствора по 100 мкл. на 1 лунку. С возможностью увеличения общего обьема 1 лунки до 200 мкл. Исследуемые коммерческие препаратыИсследуемые коммерческие препараты Путем оценки минимальной ингибирующей концентрации (МИК) можно было определить в количественном выражении антимикробную активность следующих препаратов:

Компоненты:

PropGola водно-спиртовой экстракт прополиса и мед, эфирные масла: чайного дерева, эвкалипта и мануки, витамин С и глюконат цинка. 

Propoli Fitomater 20% прополис, дистиллированная вода, этиловый спирт и красный виноградный сок.

FluProp винный дистиллированная вода, растительный глицерин, мед, экстракт водно-спиртовой прополиса 20%, исландский лишайник, сухой экстракт корня эхинацеи и корня астрагала, витамин С, глюконат цинка. Калия сорбат.

Ribes nigrum  вымоченных глицерин почки черной смородины, этиловый спирт, растительный глицерин, красный виноградный сок.

Baby Gola водный раствор корицы, чабреца и масла чайного дерева, глюконат цинка и витамина С, растительного глицерина. Калия сорбат.

Состав задекларированный производителем:

Composition of the tested products towards bacterial microorganisms

FluProp

Baby gola

Fitomater

Of

Propoli

Ribes nigrum

PropGola

propolis hydroalcoholic extract 30%

yes

 

yes

   

Icelandic lichen hydroalcoholic extract 20%

yes

       

dry extract of Echinacea root

yes

       

dry extract of astragalus root

yes

       

Vit. C

yes

yes

   

yes

Zinc gluconate

yes

yes

     

cinnamon water

 

yes

     

thyme water

 

yes

     

Essential oil of cinnamon

 

yes

     

Essential oil of tea tree

 

yes

   

yes

zinc

       

yes

macerated glycerine buds of blackcurrant

     

yes

 

red vine

     

yes

 

Propolis 20%

   

yes

   

red grape juice

   

yes

   

honey

yes

     

yes

manuka

       

yes

eucalyptus

       

yes

erisimo

       

yes

 *Содержание эссенций, масел, прополиса и других продуктов ...

Определение состава газоанализатором. 

Products analysis of   gas mass

FluProp

Baby gola

Baby gola Mirtillo

Fitomater

Of

Propoli

Ribes nigrum

PropGola

Пропановая кислота

43,05%

15,98%

4,56%

 

60,41%

 

Сорбат калия

42,27%

39,59%

17,76%

     

Глицерин растительный

   

29,49%

 

39,59%

 

Терпинен – 4 - olo

 

12,35%

6,09%

   

12,29%

Сукциновая кислота

   

3,15%

     

Eugenolo

 

21,12%

       

Коффеин

     

13,03%

   

Borneolo

 

3,31%

       

9-octadecenamide

     

25,48%

   

2-Propen-1-one

     

28,03%

 

10,50%

Etossiacetaldeide dietilacetato

         

15,19%

Уксусная кислота

         

14,32%

…и консерванты: сорбат калия и этанол.

Серии разведения тестируемых препаратов

Растворы с первоначальным добавлением 1,5 мл. этанола

Препарат

Разведение

Диапазон (%v/v)

PropGola

1:10

0,50 – 0,01

Propoli Fitomater

1:10

0,50 – 0,01

FluProp

1:4

3,70 - 0,11

Ribes Nigrum

1:4

6,80 - 0,21

Baby Gola

1:4

12,50 - 0,19

Isolation and ATCC

Препарат

Разведение

Диапазон(%v/v)

PropGola

1:5

0,50 – 0,01

Propoli Fitomater

1:5

0,50 - 0,01

FluProp

1:5

3,70 – 0,11

Ribes Nigrum

1:5

6,80 – 0,21

Baby Gola

1:5

6,80 – 0,21

Мультирезистентные штаммы

Используемые микроорганизмы

Gram positive bacteria

Bacillus subtilis ATCC 6633

Bacillus cereus ATCC 10876

Staphylococcus epidermidis Ig4

Staphylococcus epidermidis Ig1

Staphylococcus epidermidis Ig6

Staphylococcus aureus Ig5

Staphylococcus aureus Ig23

Staphylococcus aureus Ig24

Staphylococcus aureus Ig22

Staphylococcus aureus ATCC 43300

Staphylococcus aureus ATCC 29213

Staphylococcus aureus ATCC 6538p

Enterococcus faecalis ATCC 29212

Gram negative bacteria

Acinetobacter baumannii ATCC 19606

Escherichia coli ATCC 25922

Klebsiella pneumoniae ATCC 13383

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

Citrobacter freundii Ig1

Serratia marcescens Ig1

MYCETE

Candida glabrata ATTCC 6260

Candida glabrata 18A19

Candida parapsilosis 1A1

Candida albicans ATTCC 10231

Candida albicans ATTCC 24433

Candida tropicalis ATCC 750

Candida parapsilosis 11A13

Candida parapsilosis 22019

Candida albicans A18

Candida Kefyr 6258

*Микробные штаммы получены ATCC (American Type Culture Collection) и клинические изоляты (Департамент биомедицинских наук и онкологии человека - Университета Бари-лаборатории бактериологии и микологии).

Мы также использовали полирезистентные бактериальные культуры strains4.

Multi-Resistant Bacteria

Acinetobacter baumannii BS1

Klebsiella pneumoniae BS1

Acinetobacter baumannii BS2

Klebsiella pneumoniae BS2

Acinetobacter baumannii BS3

Mультирезистентность

  • Устойчивость к антибиотикам, или устойчивости к нескольким антибиотикам, представляет собой явление, при котором бактериальная популяция устойчива к антимикробной активности противомикробных препаратов;
  • Хромосомный тип, имеет способность к одной или нескольким мутациям. Становиться устойчивым к одному классу антибиотиков;
  • Внехромосомный тип, из-за присутствия плазмид, кодирующих факторы, связанные с резистентностью. В результате чего возникает отсутствие чувствительности к переменным числам антибиотиков по различным механизмам;
  • Передача информации устойчивости с помощью транспозонов (конъюгативная явления), способных перемещаться из одной точки в другие хромосом и плазмид.

Оценка минимальной ингибирующей концентрации

Грамположительные бактерии с добавлением этанола.

 

Propoli Fitomater

FluProp

PropGola

Ribes nigrum

Baby Gola

Baby Gola mirtillo

Bacillus subtilis ATCC 6633

0,25

0,23

0,25

R

6,25

6,25

Bacillus cereus ATCC 10876

0,12

0,23

0,12

1,72

6,25

6,25

Staphylococcus epidermidis Ig4

0,12

0,11

0,01

1,72

12,50

12,50

Staphylococcus epidermidis Ig1

0,12

0,46

0,01

6,80

12,50

12,50

Staphylococcus epidermidis Ig6

0,12

0,11

0,01

1,72

6,25

6,25

Staphylococcus aureus Ig5

0,25

0,23

0,25

1,72

6,25

6,25

Staphylococcus aureus Ig23

0,25

0,11

0,25

0,86

R

12,50

Staphylococcus aureus Ig24

0,25

0,11

0,25

1,72

R

12,50

Staphylococcus aureus Ig22

0,25

0,11

0,25

1,72

12,50

12,50

Staphylococcus aureus ATCC 43300

0,25

0,11

0,25

1,72

12,50

6,25

Staphylococcus aureus ATCC 29213

0,12

0,11

0,01

0,86

6,25

6,25

Staphylococcus aureus ATCC 6538p

0,12

0,23

0,12

0,86

12,50

12,50

Enterococcus faecalis ATCC 29212

0,06

0,11

0,01

0,86

12,50

12,50

Грамм отрицательные бактерии с добавлением этанола.

 

Propoli Fitomater

FluProp

PropGola

Ribes nigrum

Baby Gola

Baby Gola mirtillo

Acinetobacter baumannii ATCC 19606

0,25

0,46

0,25

6,80

1,56

1,56

Escherichia coli ATCC 25922

0,12

0,46

0,12

6,80

12,50

12,50

Klebsiella pneumoniae ATCC 13383

0,12

0,23

0,25

0,86

12,50

12,50

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

R

R

R

R

12,50

12,50

Citrobacter freundii Ig1

R

0,46

0,03

0,42

12,50

12,50

Serratia marcescens Ig1

R

1,80

R

R

12,50

12,50

Грибы с добавлением этанола

 

Propoli Fitomater

FluProp

PropGola

Ribes nigrum

Baby Gola

Baby Gola mirtillo

Candida glabrata ATTCC 6260

0,50

1,85

R

R

R

R

Candida glabrata 18A19

0,50

3,70

R

R

R

R

Candida parapsilosis 1A1

0,12

0,46

0,25

0,12

6,25

6,25

Candida albicans ATCC 10231

R

3,70

R

12,5

R

12,5

Candida albicans ATCC 24433

R

R

R

R

R

R

Candida tropicalis ATCC 750

0,12

1,85

0,5

R

R

R

Candida parapsilosis 11A13

0,12

0,92

0,12

0,12

R

R

Candida parapsilosis 22019

0,12

3,70

0,12

0,12

0,12

0,12

Candida albicans A18

0,12

1,85

0,25

R

0,25

0,25

Candida kefyr 6258

R

3,70

R

R

R

R

Mультирезистентные бактерии с добавлением этанола

 

Propoli Fitomater

FluProp

PropGola

Ribes nigrum

Baby Gola

Baby Gola mirtillo

Acinetobacter baumannii BS1

R

3,70

R

6,80

6,80

6,80

Klebsiella pneumoniae BS1

R

1,85

R

3,40

6,80

6,80

Acinetobacter baumannii BS2

R

3,70

R

6,80

6,80

6,80

Klebsiella pneumoniae BS2

R

1,85

R

3,40

6,80

6,80

Acinetobacter baumannii BS3

R

1,85

R

6,80

6,80

6,80

Грамм положительные бактерии без добавления этанола

 

Propoli Fitomater

FluProp

PropGola

Ribes nigrum

Baby Gola

Baby Gola mirtillo

Bacillus subtilis ATCC 6633

0,23

0,23

0,25

R

6,25

6,25

Bacillus cereus ATCC 10876

0,11

0,23

0,25

3,40

6,25

6,25

Staphylococcus epidermidis Ig4

0,11

0,92

0,25

3,40

12,50

12,50

Staphylococcus epidermidis Ig1

0,11

1,85

0,25

3,40

12,50

12,50

Staphylococcus epidermidis Ig6

0,11

0,92

0,25

3,40

6,25

6,25

Staphylococcus aureus Ig5

0,11

0,92

0,06

1,70

6,25

6,25

Staphylococcus aureus Ig23

0,23

0,11

0,25

1,70

R

12,50

Staphylococcus aureus Ig24

0,23

0,23

0,25

1,70

R

12,50

Staphylococcus aureus Ig22

0,23

0,05

0,25

1,70

12,50

12,50

Staphylococcus aureus ATCC 43300

0,23

0,92

0,06

1,70

12,50

6,25

Staphylococcus aureus ATCC 29213

0,46

0,92

0,25

6,80

6,25

6,25

Staphylococcus aureus ATCC 6538p

0,11

0,05

0,25

0,21

12,50

12,50

Enterococcus faecalis ATCC 29212

0,11

0,11

0,25

3,40

12,50

12,50

Грамм отрицательные бактерии без добавления этанола

 

Propoli Fitomater

FluProp

PropGola

Ribes nigrum

Baby Gola

Baby Gola mirtillo

Acinetobacter baumannii ATCC 19606

0,23

0,46

0,25

6,80

1,56

1,56

Escherichia coli ATCC 25922

0,23

0,92

0,12

6,80

12,50

12,50

Klebsiella pneumoniae ATCC 13383

0,46

0,23

0,25

0,85

12,50

12,50

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

R

R

R

13,60

12,50

12,50

Citrobacter freundii Ig1

R

1,85

0,50

0,42

12,50

12,50

Serratia marcescens Ig1

0,92

R

R

13,60

12,50

12,50

Мультирезистентная микрофлора без добавления алкоголя

 

Propoli Fitomater

FluProp

PropGola

Ribes nigrum

Baby Gola

Baby Gola mirtillo

Acinetobacter baumannii BS1

R

8,50

R

7,00

10

10

Klebsiella pneumoniae BS1

R

8,50

R

3,50

10

10

Acinetobacter baumannii BS2

R

8,50

R

7,00

10

10

Klebsiella pneumoniae BS2

R

8,50

R

3,50

10

10

Acinetobacter baumannii BS3

R

8,50

R

7,00

10

10

Дальнейшее испытание на нескольких штаммах устойчивых бактерий для оценки действия этанола (7,5 до 0,11% об.) и сорбата калия (1,00 до 0,03% об.)

Multi-resistant Gram-negative bacteria

Ethanol

Acinetobacter baumannii BS1

R

Klebsiella pneumoniae BS1

R

Acinetobacter baumannii BS2

R

Klebsiella pneumoniae BS2

R

Acinetobacter baumannii BS3

R

Этанол является эффективным средством против грамположительных, отрицательных бактерий и грибов, но неэффективным для мультирезистентных.

Оценка с сорбатом калия

Multi-resistant Gram-negative bacteria

Potassium sorbate

Acinetobacter baumannii BS1

R

Klebsiella pneumoniae BS1

R

Acinetobacter baumannii BS2

R

Klebsiella pneumoniae BS2

R

Acinetobacter baumannii BS3

R

Рейтинг бактерицидной активности на фото внизу статьи.

Мы можем сделать вывод, что результаты исследования обусловлены:

  • Многоцелевым действием
  • Синергическим действием
  •  Наличием пропионовой кислоты

Результаты исследования

PropGola: Препарат активен для бактериальных штаммов и грибков, кроме

PropGola: Препарат активен для бактериальных штаммов и грибков, кроме двух грамотрицательных штаммов. На мультирезистентные штаммы действия двух грамотрицательных штаммов. На мультирезистентные штаммы действия не оказывает. не оказывает.

Propoli Fitomate: за исключением трех случаев грамотрицательных бактерий,

Propoli Fitomate: за исключением трех случаев грамотрицательных бактерий, Citrobacter freundii IG1, синегнойной палочки, Serratia marcescens IG1, оказался Citrobacter freundii IG1, синегнойной палочки, Serratia marcescens IG1, оказался активным. Препарат имеет мягкий эффект на грибы и активен по отношению к активным. Препарат имеет мягкий эффект на грибы и активен по отношению к мульти-резистентным штаммам бактерий. мульти-резистентным штаммам бактерий.

FluProp: Он имеет антимикробное и противогрибковое действия. Имеет активность только для грамотрицательной синегнойной палочки. Оказывает бактериостатическое действие на мультирезистентные штаммы бактерий.

Ribes nigrum: активен для бактерий и грибов и некоторых грамотрицательных бактерий, кроме: синегнойной палочки Serratia marcescens. Оказывает сильный бактериостатическое действие на мультирезистентные штаммы бактерий.

Baby Gola: компоненты солюбилизируют в отсутствие этанола. Препарат имеет заметную антибактериальную активностью и эффективность против грибковых штаммов. А так же показывает, мощное бактерицидное действие против полирезистентных штаммов бактерий. Это экспериментальное исследование еще раз показывает, определенным образом, способность к выраженному и мощному противомикробному действию Спагириков от Erbenobili. Бактериостатическое и бактерицидное действие обнаружено к бактериальным штаммам с необычным для последних особым биологическим арсеналом, способным оказывать антимикробное действие недоступное большим количествам классических антибиотиков. Так как это исследование ограничивается опытом в in vitro, это еще более увеличивает ценность применения данных препаратов в тяжелых случаях лечения бактериальных инфекций связанных с бактериальной резистентностью. Thanks for your attention Thanks to: Doctor Vincenzo Corrado MD (Hospital Don Uva – Bisceglie (BA) for the multi-resistant bacterial strains. Erbenobili srl di Corato (BA) for the provided products.

Поддержка сайта