+ 375 17 283 17 38

+ 375 17 283 17 38

RU EN   

Лектины – потенциальные источники и потенциальная польза

Лектины – потенциальные источники и потенциальная польза

 Wolfgang Kreis

Введение

Термин «лектин» был введен Вильямом Бойдом в 1954 году и применяется он для описания протеинов, обладающих способностью связывать углеводы. Лектины можно классифицировать на основе их специфичности по отношению к углеводам, или же – в зависимости от их общей структуры – их можно подразделять на меролектины, хололектины, химеролектины и суперлектины. Для их классификации можно также использовать их биологическую активность. Например, рибосома-инактивирующие протеины типа 2 (RIP) вызывают каталитическую инактивацию рибосом. Наиболее известными представителями этого семейства являются рицин и лектины омелы. Общепризнанным является то, что лектины омелы (ML I) могут назначаться онкобольным для улучшения качества жизни.

Встает вопрос, является ли это качество специфичным для ML I, или же другие растительные лектины могут также применяться аналогичным, или может быть еще более специфичным образом, поскольку другие виды растений содержат RIP (дубль типа 2), которые не обладают той огромной неспецифичной токсичностью, которая характерна, например, для рицина. Именно такие нетоксичные RIP типа 2 являются перспективными агентами для терапии рака. Эта статья имеет целью дать обзор потенциальных источников лектинов, их получения и потенциальных областей их применения.

Источники лектинов: Лектины содержатся в разнообразных организмах, при этом важными их источниками являются растения. В отличие от других организмов, некоторые растения вырабатывают и накапливают лектины в довольно больших количествах. Лектины могут накапливаться в корнях и клубнях (Astragalus, Remusatia, Phytolacca), или же в плодах и семенах (Hibiscus, Phaseolus, Ricinus). Особенно богатыми источниками лектинов являются овощи.

Получение лектинов: Лектины, обладающие специфичностью к конкретным углеводам, выделялись из различных растительных тканей и других организмов. Следует учесть, что специфичные лектины, представляющие особый интерес, но содержание, которых в природных источниках мало, могут в настоящее время быть получены с помощью рекомбинантной техники с использованием клеток E.coli, преобразованных подходящим вектором экспрессии, содержащим кДНК или ген, в котором закодирована последовательность целевого лектина.

Потенциальные области применения лектинов: Лектины обладают самыми разнообразными и крайне интересными видами биологической активности, включая противогрибковую, противоопухолевую, ингибирующую обратную ВИЧ-1-транскриптазу и иммуномодулирующую активность, которые могут найти клиническое применение. В этом обзоре особый упор делается на противораковую активность. Например, лектины могут вызывать апоптоз у различных линий раковых клеток. В числе исследованных примеров можно назвать лектин Sophora flavescens (клетки HeLa), лектин Polygonatum odoratum (клетки фибросаркомы) и лектин Polygonatum cyrtonema (клетки меланомы человека).

Ключевые слова: Рак, лектин, рекомбинантная технология, RIP. 

Лектины омелы как биологически активные вещества в водных экстрактах омелы

 U. Pfueller, U. Schumacher 

Водные экстракты омелы содержат самые разнообразные потенциально терапевтически активные вещества, которые в целом ответственны за широкий спектр физиологических явлений, наблюдающихся после применения омелы. Однако в настоящее время большое число накопленных данных дают основания полагать, что основными биологически активными веществами, ответственными за иммуномодулирующие и цитотоксические эффекты, являются три лектина омелы (ML).

В то время как молекулярные структуры ML-I и ML-III были установлены с помощью рентгенографической кристаллографии, молекулярная структура ML-II этим методом пока еще не изучалась. Будут представлены данные по целевым структурам галактозил-/N-ацетилгалактозил (гликопротеинов), включая те, которые были получены в исследованиях модификации галактозильных остатков сиаловой кислотой, а также картины связывания с модифицированными гликопротеинами, наблюдаемой для этих двух лектинов. ML связываются не только с углеводами, но также и с пептидными структурами, которые работают как гликомиметики.

Вследствие этого, будут представлены данные об исследовании связывания ML-I с пептидными секвенциями протеина 5, родственного многим лекарственным началам. Кроме этого будет обсуждаться связывание ML-I с гликолипидами, содержащими нейраминовую кислоту, такими как альфа-сиалилированные неолактоганглиозиды. Будут представлены новейшие данные о блокировании углевод-распознающего домена ML синтетическими гликоаналогами. Эти новые блокирующие вещества были протестированы на лектинах впервые.

Вдобавок к этим трем ML, был описан четвертый, хитин-связывающий лектин (VisalbCBA), обладающий специфичностью по отношению к олигомерному –N-ацетиглюкозамину. Этот лектин принадлежит к другому генетическому семейству, чем три «классические» ML.

Биологические свойства ML, их биологическое наличие и стабильность, подвержены влиянию других компонентов экстрактов омелы, в число которых входят амфифильные вискотоксины, VisalbCBA и полисахариды. Иммуномодулирующие и цитотоксические эффекты ML будут обсуждаться в контексте с их потенциальными партнерами по связыванию.

Ключевые слова: Омела, лектины омелы, молекулярная структура, специфичность сахаров, цитотоксичность, иммуномодуляция.

Роль воспаления в патогенезе рака

 Reinhild Klein

 Хроническое воспаление играет критическую роль в онкогенезе. Так, например, было показано, что сохраняющиеся на протяжении длительного времени токсические (курение сигарет, экспозиция на асбест и силикагель и т.п.), вирусные (Helicobacter pylori, Mycobacterium tuberculosis, и т.п.), или паразитные (Schistosoma и т.п.) воздействия, приводящие к хроническому воспалению, сопряжены с повышенным риском развития рака. Напротив, острые воспалительные процессы могут оказывать скорее благотворное действие в плане разрушения уже существующих опухолей.

Иммунная система состоит из двух главных компонентов: врожденной и адаптивной иммунной системы. Врожденный иммунитет распознает присутствие инородных тел, которые образовались в результате  инфекции, либо повреждения тканей, и обеспечивает защиту, активно вызывая воспалительную, антимикробную или антистрессовую реакцию. Он также подпитывает адаптивную иммунную систему в случае, если угроза сохраняется. Генетические мутации во врожденной иммунной системе, изменяющие это равновесие, приводят к усиленному онкогенезу. Адаптивная иммунная система состоит из клеточной и гуморальной иммунной систем. Клеточная реакция обеспечивает скорее анти-ангиогенный и про-апоптотический эффекты, доминирование гуморальной иммунной реакции рассматривалось как благоприятствующее действие для прогрессирования опухоли, хотя наблюдался также и противоположный эффект. В случае рака, развивающегося в условиях хронического воспалительного процесса, наблюдается не только общее усиление регуляции иммунных реакций, но и сдвиг иммунной реакции в сторону, которая характеризуется ранозаживляющим, проангиогенным и антиапоптотическим эффектом.

По мере развития злокачественного процесса раковые клетки стремятся уменьшить клеточный иммунный ответ. В таких ситуациях острый воспалительный процесс может оказаться даже благотворным из-за активации врожденной иммунной системы, в особенности нейтрофилов и природных клеток-убийц (NK-клеток), атакующих клетки опухоли. Вследствие этого, лечение веществами, приводящими к возникновению острого воспаления и активирующими нейтрофилы и NK-клетки, таким как экстракты омелы, может снизить переносимость по отношению к опухолевым антигенам и повысить эффективность процесса разрушения и удаления клеток опухоли.

Все эти процессы, однако, уникальны для каждой конкретной опухоли. По этой причине непрерывное совершенствование нашего понимания сложной взаимосвязи между различными компонентами реакции «хозяина» при развитии рака является жизненно необходимым условием для нахождения потенциально новых подходов в лечении этих заболеваний. 

Ключевые слова: Хроническое воспаление, канцерогенез, клеточная иммунная система, гуморальная иммунная система, иммунный гомеостаз.

Молекулярные подходы для индивидуализированной опухолевой терапии с помощью стандартных лекарств, фитохимических соединений и лекарственных трав

Thomas Efferth 

Анализы, проводимые с целью предсказать реакцию опухоли на химиотерапию, важны для осуществления специально спланированного индивидуального лечения. В клинических условиях химиотерапия часто сопровождается возникновением устойчивости к лекарственным препаратам (Gillet et al. 2004). Поскольку большинство традиционно применяемых цитостатических лекарств характеризуется недостаточной специфичностью по отношению к опухолям, здоровые ткани также подвергаются негативному токсическому воздействию. Большую пользу для пациентов могло бы принести применение новых стратегий, направленных на расширение узкого терапевтического диапазона, путем разделения  эффективной и токсической доз.

Хотя статистическая вероятность терапевтического успеха для больших групп пациентов хорошо известна из результатов клинико-терапевтических испытаний, тем не менее невозможно предсказать, как отдельно взятая опухоль будет реагировать на терапию (Volm et al. 2002). Хотя клинико-патологические факторы (размер опухоли, метастазы в лимфатические узлы и в другие органы) имеют прогностическую ценность для крупных когорт, они в меньшей степени способны предсказать успех лечения или побочные эффекты у отдельных пациентов. Вследствие этого, были приложены определенные усилия для того, чтобы предсказывать реакцию на лекарства in vitro (Efferth et al. 2008). Идея заключается в том, чтобы определять чувствительность или устойчивость заранее, с тем, чтобы впоследствии  выбрать клинически наиболее эффективный индивидуальный режим лечения для каждого пациента.

С появлением молекулярной биологии был начат процесс по генетической идентификации опухолей, которые обладают устойчивостью к лекарствам. Перенос этой техники от лабораторного стола к больничной койке все еще остается невыполненной задачей. Тем не менее, нынешний прогресс в этой области дает основания надеяться, что молекулярные подходы значительно улучшат терапию отдельных (индивидуальных) опухолей.

Мы представляем опыт в отношении тестирования для предсказания химиочувствительности, накопленный на протяжении последних двух десятилетий. Охватываемый тематический диапазон простирается от важных цитотоксических анализов, иммуногистохимического обнаружения прогностических маркеров реакции опухолей на терапию и времени выживаемости пациентов до современной фармакогеномной техники (сравнительная гибридизация генома, ДНК methylation arrays, мРНК and микро-РНК expression arrays, etc.) (Efferth, 2010).

Наши собственные данные, полученные этими методами, будут сравниваться с клиническими данными пациентов. Мы представим результаты по предсказанию чувствительности и устойчивости, как по отношению к классическим противораковым лекарствам, так и по отношению к фитохимическим соединениям и лекарственным травам (Li et al. 2008). Представленные приемы важны также и для таких фитотерапевтических лекарств, как препараты омелы, которые уже хорошо укоренились в рутинной клинической практике.

Ключевые слова: Устойчивость к лекарствам, генетика, microarrays, персонализованная медицина, фармакогеномика, фармакогностика, фитотерапия, прогностический фактор, время выживаемости. 

Современное состояние и новые разработки в области антропософской терапии омелой – Результаты серии экспертных конференций, проведенных Немецкой ассоциацией врачей-антропософов (GAAeD) 2008-2011

 Thomas Breitkreuz 

На протяжении 4-летнего периода (начало 2008 – конец 2011 гг.) Немецкая ассоциация врачей-антропософов (GAAeD) принимала у себя серию из 8 экспертных конференций, каждую из которых посещали 100-130 опытных врачей и онкологов из антропософских больниц, онкологических отделений, а также хирургических и специализированных центров здравоохранения. На этих семинарах обсуждалось современное состояние и новые разработки в области терапии омелой, выполненные экспертами, а также лучшие случаи и серии случаев по их применению.

Каждый из этих семинаров концентрировал основное внимание на опухолях в каком-либо органе или системе органов и включал в себя экспертный коллоквиум, темами которого были специальные вопросы, связанные с лечением омелой, например стратегия дозирования, индукция гипотермии, выбор питающего дерева (для омелы), различные способы введения лекарства (подкожный, внутривенный, оральный, или внутрь пораженной ткани), а также дифференциальная терапия - в соответствии с различными производственными процессами, которые применяются для антропософских препаратов омелы.

Целью этих конференций было отразить и обсудить самое лучшее из опыта экспертов и сделать основой для обогащения клинических направлений, используемых при лечении, и как стимул для новых исследований по применению препаратов омелы  с целью оптимизации вариантов лечения в области антропософской терапии.

В этой лекции будет представлен обзор наиболее важных результатов этой серии конференций и их возможного влияния на будущие стратегии в целях оптимизации лечения омелой.

Ключевые слова: Немецкая ассоциация врачей-антропософов (GAAeD), экспертные конференции, антропософское лечение омелой, наилучший практический опыт, стратегии оптимизированной терапии.

 Клинические исследования терапии омелой при раке – статус-кво, современные проекты и разработки

 Gunver S. Kienle

 Было выполнено большое количество исследований с целью изучения влияния терапии омелой на рак, особенно в плане качества жизни, выживаемости, реакции опухоли и вопросов, связанных с безопасностью. Эти исследования, их результаты и методологическое качество оценивались в разнообразных систематических обзорах. Недавние разработки направлены на проведение исследований, которые соответствуют современным методологическим стандартам и дающих однозначный ответ на конкретные вопросы, связанные с эффективностью, безопасностью или фармакологией, или дающих более широкую оценку применения в ежедневной практике с помощью эпидемиологических методов.

В то время как клинические исследования в общем понимании первоначально развивались из практики научно-ориентированных практикующих врачей, пытающихся получить ответ на некоторые вопросы клинического характера, в последние десятилетия клинические исследования стали главным инструментом, с помощью которого фармацевтическая промышленность стремится достичь соответствия тем требованиям, которые предъявляются при получении разрешения на реализацию лекарства. И все же, антропософская терапия омелой все еще является предметом разнообразных исследовательских проектов, проводимых врачами и для врачей, для того, чтобы ответить на конкретные клинико-терапевтические вопросы, и далее развивать клиническое применение терапии омелой.

Ключевые слова: Омела, клинические исследования, качественные исследования, систематические обзоры.

 Пересмотр общей характеристики продукта для антропософских препаратов, содержащих омелу в парентеральных дозированных формах – Результат компромисса между владельцами регистрационных удостоверений и Немецким Федеральным Институтом Лекарств и Медицинских Изделий

 Werner, M. Kirch, I. Spingler-Kliemsch, W. Knoess

 Цель: Из-за многочисленных случаев судебных разбирательств в отношении маркировки антропософских препаратов, содержащих омелу в парентеральных дозированных формах, Немецкий Федеральный Институт Лекарств и Медицинских Изделий (BfArM) пригласил антропософских Владельцев Регистрационного Удостоверения (MAH) для обсуждения компромисса, приведшего к пересмотру стандартной Общей Характеристики Продукта (SPC) для всех важных препаратов.

Методы: В нескольких встречах, имевших место в период с марта по август 2010 г., были определены критически важные вопросы и возможность их решения были предметом переговоров. Затем всех участников попросили вносить предложения для достижения возможного компромисса, которые могли лечь в основу дальнейших действий.

Результаты: Результатом явилось стандартное SPC для разрешенных антропософских лекарственных препаратов, содержащих омелу в дозированных парентеральных формах, позволяющее вносить небольшие адаптации в отношении заявленного содержания, вида изготовления препаратов (изготовление гемеопатическим способом или же другим антропософским), а также других доклинических данных, которые вносились различными владельцами регистрационных удостоверений. Владельцы Регистрационных удостоверений признали необходимость пополнения данных по клинической иммунотоксичности, в особенности для препаратов, содержащих эквиваленты более 1 мг травяной субстанции омелы.

Заключения: Было выработано новое стандартное SPC для всех антропософских лекарственных продуктов, содержащих омелу в парентеральных дозировочных формах. Оно было представлено в Комиссию и введено в действие путем соответствующих процедур.

Ключевые слова: Омела, немецкое SPC.

 Возможности и ограничения в лечении рака протоков поджелудочной железы

 Thomas Seufferlein

 Рак протоков поджелудочной железы все еще имеет неблагоприятный прогноз. Эта опухоль характеризуется поздним диагностированием из-за своей неспецифичности или отсутствия  ранних симптомов, ранним появлением метастазов и относительной устойчивостью к радио- и химиотерапии. Шанс на излечение существует лишь тогда, когда достигается R0-резекция опухоли.

Применение новых вспомогательных средств пока еще не укоренилось в качестве одного из вариантов лечения рака поджелудочной железы. Было выполнено несколько небольших испытаний с использованием химиотерапии или радиохимиотерапии, а также вспомогательных средств в качестве новых направлений применения. Их результаты требуют подтверждения в более обширных рандомизированных исследованиях. В испытаниях ESPAC и CONKO-001 было установлено, что в качестве послеоперационного (после R1-резекции) вспомогательного или дополнительного лечения самым лучшим вариантом является химиотерапия.

Наиболее предпочтительным лекарством для вспомогательного лечения является гемцитабин, поскольку он характеризуется более мягким профилем токсичности, по сравнению с болюсом 5-фторурацил. Вспомогательная химиотерапия с применением гемцитабина (или 5-фторурацила) увеличивает процент выживаемости на протяжении 5-летнего периода с 9 % до 20 %.

В условиях паллиативного лечения химиотерапия может продлить срок выживаемости и уменьшить проявление симптомов, таких как боль или потеря в весе. Здесь стандартом в плане лечебного протокола является гемцитабин. Гемцитабин можно комбинировать с небольшой молекулой Эрлотиниба (торцева), ингибитора тирозин-киназы рецепторов EGFR, которая, как было показано, продлевает общий период выживания в сочетании с гемцитамином, если у пациента развивается выраженная кожная сыпь в первые недели лечения  этим препаратом. Другие виды «целенаправленной терапии», такие как матричные ингибиторы металлопротеазы, ингибиторы ангиогенеза, антитела анти-EGFR или ингибиторы фарнезил-трансферазы не дали желаемых результатов в обширных испытаниях фазы III. Новые соединения, такие как ингибиторы «sonic hedgehog» или «Notch pathway» являются в настоящее время предметом клинических исследований.

Недавно в исследованиях французской группы ученых было продемонстрировано, что с помощью интенсивной химиотерапии с применением сочетания 5-фторурацила, иринотекана и оксалиплатина (т.н. протокол FOLFRINOX, Conroy et al., NEJM 2011, 364; 19:1819) может быть достигнута общая средняя выживаемость при наличии метастазов в течение более 11 месяцев. Соответствующий показатель для гемцитабина составляет всего 6,2 месяца. Однако лечебный прием с использованием такого сочетания характеризуется существенно большей токсичностью в сравнении с гемцитабином, в особенности гематологической и желудочно-кишечной токсичностью.

Заключение: Данные исследования FOLFRINOX показывают, что лечить рак поджелудочной железы можно более эффективно. Будущие стратегические изыскания должны быть направлены на то, чтобы использовать такие лечебные режимы, которые бы позволяли выполнять больше хирургических R0-резекций, как единственного средства при лечении рака поджелудочной железы, приводящего к выздоровлению.

Ключевые слова: Рак поджелудочной железы, целенаправленные виды терапии, вспомогательное лечение, паллиативное лечение.

 Терапия омелой при вспомогательной и паллиативной терапии карциномы поджелудочной железы: Концепции - факты-перспективы

 Matthes, D. Buchwald, F. Schad 

Введение: Аденокарцинома поджелудочной железы (PCa) все еще является проблемой в плане диагностики и лечения. Менее 10% РСа излечимы с помощью R0-резекции во время постановки диагноза, процент выживаемости в течение 5 лет составляет менее 1%, а средний период выживания - 5-6 месяцев. Кистозные новообразования в поджелудочной железе являются гетерогенной группой патологических образований, характеризующихся очень различным биологическим поведением.

В то время как большинство серозных кистаденом (SCA) можно лечить не прибегая к операции, пациенты с муцинозными (mucinous) кистозными новообразованиями (MCN), солидными псевдопапиллярными опухолями (SPT), внутриканальными папиллярными мусцинозными новообразованиями в главном канале (IPMN) должны подвергаться хирургической операции. За IPMN в боковых каналах можно вести радиологическое и клиническое наблюдение, если они асимптоматичны, имеют размер менее 3 см и не имеют радиологических признаков злокачественности.

Материалы и методы: Был сделан обзор литературы и опыта авторов.

Результаты: Ретроспективное многоцентровое фармако-эпидемиологическое исследование, проведенное на 396 пациентах с применением вспомогательной терапии в виде подкожного введения препарата омелы в дополнение к стандартной терапии гемциатабином показало значительное улучшение качества жизни и ослабление симптомов, а также общее увеличение выживаемости (OS) (Matthes et al. 2010). Первоначальное пробное исследование с внутриопухолевым введением омелы, проведенное на 14 пациентах, показало еще большую выживаемость «OS», в среднем порядка 9,9 месяцев, а также повышение качества жизни (Matthes et al. 2008). Обсервационное исследование с применением внутриопухолевого введения омелы, выполненное на 39 пациентах с неоперабельной РСа, показало увеличение выживаемости в стадии III 12,2 месяца, а в стадии IV – 11,2 месяца.

Таким образом, показатели  OS в случае сопутствующего внутриопухолевого введения омелы примерно в два раза превышают показатели, получаемые при монотерапии генцитабином в когорте сравнения (Afchain et al. 2009; Cunningham et al. 2009). Переносимость омелы при внутриопухолевом введении хорошая: серьезных неблагоприятных явлений не наблюдалось. Это понимает вопрос о том, можно ли достичь положительного терапевтического результата также и при пред-злокачественных и злокачественных кистозных поражениях поджелудочной железы. Первоначальные исследования отдельных случаев и документальные свидетельства дают основания ожидать положительных данных.

Заключения: Данные, полученные в первоначальных исследованиях, выполненных на когортах пациентов с использованием подкожного и внутриопухолевого введения препаратов омелы, показывают улучшение качества жизни и общее увеличение выживаемости. Кроме этого, имеются первые положительные результаты, полученные в случаях кистозных (пред-) злокачественных поражений.

Ключевые слова: Омела, новообразования поджелудочной железы, терапия рака поджелудочной железы, обзор, внутриопухолевое введение омелы, Viscum album L..

 Локализация лектинов омелы ML-I-III в Viscum album L., определяемая с помощью иммунофлуоресцентных меток и иммунных меток золотом. 

Blaschek, J.C. Gramann, B. Classen

 Цель: Из-за своих иммуномодулирующих и цитотоксических свойств экстракты омелы играют важную роль в качестве фитотерапевтических вспомогательных веществ в терапии рака. Основной вклад в активность препаратов омелы in vivo  вносят лектины омелы ML I-III. Они состоят из двух цепей: цепь В необходима для связывания  со специфическими эпитопами углеводов на поверхности клеток-мишеней, в то время как цепь А отвечает за ингибирование трансляции. Локализация биоактивных лектинов омелы в Viscum album имеет значение для понимания распределения и физиологической роли лектинов в самом растении, а также для оптимизации получения фармацевтических препаратов.

Методы: Распределение лектинов по клеткам различных частей и тканей растения омелы изучалось с помощью внесения иммунофлуоресцентных меток. Тонкие срезы листьев и межузловые участки побегов Viscum album L. обрабатывались моноклональными антителами, направленными против А-цепи лектинов омелы I-III. Добавлялись вторичные антитела с флуоресцентной меткой, и эти срезы анализировались с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии. Межклеточная локализация лектинов устанавливалась с помощью иммунных меток золотом с проведение анализа методом трансмиссионной электронной микроскопии.

Результаты: Лектины омелы I-III в межузловых участках локализовались главным образом  в клетках паренхимы коры, в тканях склеренхимы, соседствующих с пучками сосудов, а также в клетках-компаньонах флоэмы. Особенно высокое содержание лектинов обнаруживалось в клетках паренхимы третьего и четвертого межузловых участков, в то время как клетки паренхимы листьев показывали лишь слабое содержание меток. Внутри паренхимальных клеток лектины обнаруживались внутри вакуолей, главным образом в тесном контакте с протеиновыми образованиями.

Заключения: Лектины омелы локализуются главным образом в побегах растения, в то время как листья содержат лишь незначительные их количества, Было показано, что внесение иммунных меток является чувствительным методом  для точной локализации лектинов омелы в растительных тканях, и они могут быть также использованы для установления распределения  и специфичного связывания ML I-III в тканях человека и животных.

Благодарности: Мы благодарим компанию Rottapharm/Madaus GmbH, Кельн, за финансовую поддержку.

Ключевые слова: Лектины омелы, метод иммунных меток, локализация в растительных тканях.

 Накопление изоформ вискотоксинов Viscum album ssp. album в различных органах растения в зависимости от времен года.

 Urech, G. Schaller, H. Ramm, S. Baumgartner

 Цель: Ботанические аспекты, связанные с наличием и динамикой фармакологически активных веществ Viscum album позволяют не только характеризовать омелу, но также представляют собой основу фармацевтических исследований. Вследствие этого, в настоящем исследовании  изучались качественный и количественный состав изоформ вискотоксинов (VT), присутствующих в различных органах Viscum album ssp. album в различные времена года.

Методы: От Malus domestica отбирались следующие представительные образцы V. album ssp. album: листья и стебли - два раза в месяц на протяжении 3 лет, топляк и корковые нити ксилемы и кора - каждые 2 месяца на протяжении 16 месяцев, а также все части в профиле растения омелы с двух целых кустов. Их экстрагировали 0,02 М уксусной кислотой в гомогенизаторе Polytron, и выполнялось количественное определение изоформ VT методом ВЭЖХ.

Результаты: Порции VT А1, А2 и А3 (% от всего VT), обнаруженные в кусте омелы, показывали градиент от низких значений в старых стеблях – до более высоких значений в генеративных органах, расположенных ближе к верхушке. Вискотоксин B был единственным видом VT, который присутствовал в топляке и доминировал в старых стеблях. Корковые нити, однако, содержали VT А1, А2, А3 и В, в пропорциях, в среднем, 7.0 %, 41.8 %, 11.5 % и 39.9 %, соответственно. Сезонные изменения в содержании изоформ VT в листьях в первый и второй год роста варьировали мало. К моменту окончания периода роста в мае начиналось разложение VT А1, А2 и А3, в то время как VT В оставался без изменений, так что его доля увеличивалась (до примерно 80 %) вплоть до опадания листьев.

Заключения: Наблюдались количественные и качественные различия в составе VT, содержащихся в различных органах растения и в различные времена года. Регулирование растением омелы качественного состава VT и процессов их разложения, документально зарегистрированное в результатах данного исследования, дает основания считать, что для изготовления фармацевтических препаратов следует использовать только определенные части растения и собирать их в определенное время года, чтобы свести к минимуму изменчивость в сложном составе растительного материала.

Ключевые слова: Омела (Viscum album), изоформы вискотоксинов, сезонные изменения, топляк, листья, стебли.

 Формирование истинного двойного слоя при косом ударе капли по поверхности жидкости, обе из которых покрыты липидным монослоем

 M. Vranceanu, G. Leneweit

 Цель: Во время изготовления препаратов омелы применяются разнообразные процессы, протекающие в токе жидкости. Есть интригующий вопрос: могут ли во время этих процессов образовываться постоянные коллоидные структуры, и какой вклад такие структуры вносят в терапевтические эффекты?

Методы: Две поверхности жидкости, покрытые фосфолипидным монослоем, приводятся в контакт путем косого удара капли по поверхности жидкости. За динамическим превращением монослоев ведется наблюдение путем создания флуоресцентного изображения с помощью липидов с флуоресцентной меткой.

Результаты: Асимметричные двойные слои могут получаться путем сочетания капли и монослоев-мишеней. Напротив, симметричные двойные слои или многослойные структуры образуются при разрушении сжатых монослоев-мишеней. Мы показываем, что при всех исследованных условиях происходит образования двойного слоя/многослойной структуры. Экспериментальные условия для образования асимметричных и симметричных двойных слоев количественно описываются с помощью реологических (эластичность поверхности и продольная вязкость) и гидродинамических параметров (число Вебера и угол соударения). Состав и механические свойства фосфолипидных монослоев сильно влияют на картину удара капли и образование двойного слоя или многослойных структур.

Заключения: Образование постоянных коллоидных структур, состоящих из двухслойных фаз, подобных, например, липосомам, является возможной интерпретацией предложений Рудольфа Штейнера о применении процессов, происходящих в токе жидкости, и может быть использовано для улучшения целевой доставки лекарства к участку действия применительно к препаратам омелы в терапии рака.

Ключевые слова: Процессы в токе жидкости, образование липидного двойного слоя, реология монослоев, липосомы, целевая доставка лекарств.

 Терапевтическая эффективность природных соединений Viscum album L. при острой лимфобластической лейкемии

 Catharina I. Delebinski, Sebastian Jaeger, Kristin Kemnitz-Hassanin, Guenter Henze, Holger N. Lode, Georg Seifert

 Viscum album L. (омела) является одним из наиболее широко применяемых лекарственных средств в терапии рака. Однако тритерпены, обладающие известными противораковыми свойствами, из-за своей малой растворимости присутствуют в водных экстрактах лишь в очень малых количествах. Используя циклодекстрины, оказалось возможным  солюбилизировать (коллоидно растворять) тритерпеновые кислоты омелы (главным образом олеаноловую кислоту, ОА) и получить растительный экстракт с высоким содержанием ОА и лектинов омелы (ML). В настоящем исследовании мы впервые определили эффективность конкретно определенных экстрактов омелы против острой лимфобластической лейкемии человека (ALL) in vitro и in vivo.

Эти экстракты омелы содержали либо лектины (водный экстракт, viscum) или солюбилизированные циклодекстрином тритерпеновые кислоты (TT), такие как олеаноловая и бетулиновая кислота, а также их сочетание (viscumTT). Мы использовали модель пред-ALL B (NALM-6) на мышах C.B-17/SCID и провели тестирование эффективности и механизмов лечения этими препаратами in vitro и in vivo. Апоптоз определяли с помощью анализов потенциала митохондрий и Annexin/PI, а также вестерн-блоттинга. Экстракты Viscum album L. ингибировали размножение клеток и показывали цитотоксические свойства in vitro. Анализы Annexin/PI и митохондриального потенциала указывали на доза-зависимую индукцию апоптоза, как основной механизм гибели клеток. На основании этих данных мы исследовали эффект экстрактов Viscum album L. in vivo. Средний период выживания мышей, получавших PBS, составлял 38 дней, в то время как viscumTT продлевал это период до 50.5 дней. В итоге, мы впервые продемонстрировали, что как солюбилизованные тритерпеновые кислоты, так и лектины, а также их сочетание, вызывают доза-зависимый апоптоз в клеточной линии ALL NALM-6.

На основании данных, полученных in vivo, мы считаем, что экстракты Viscum album L., содержащие тритерпеновые кислоты, могут обладать внушительным терапевтическим потенциалом. Таким образом, наши исследования могут служить важным исходным элементом для планирования будущих экспериментальных исследований и клинических испытаний в целях изучения влияния индивидуальных соединений и потенциальных синергических эффектов в случаях ALL.

Ключевые слова: NALM-6, ALL, апоптоз, фитотерапия, олевноловая кислота, Viscum album L.

 Усиление анти-меланомной активности экстрактов омелы путем их обогащения солюбилизированными тритерпеновыми кислотами

 C.M. Strueh, S. Jaeger, A. Kersten, C.M. Schempp, A. Scheffler, S.F. Martin

 Экстракты омелы часто применяются в качестве дополнительной терапии рака, хотя обсуждение эффективности такой терапии содержит противоречивые мнения. Разрешенные для применения экстракты омелы содержат главным образом водорастворимые вещества растения омелы, а именно лектины омелы. Однако омела содержит также тритерпеноиды (главным образом олеаноловую кислоту), которые являются нерастворимыми в воде компонентами, обладающими противоопухолевыми свойствами.

Для того, чтобы избежать их потери в водных экстрактах, мы солюбилизировали тритерпеноиды омелы с помощью циклодекстринов, тем самым делая их доступными для проведения тестирования противораковых свойств на животных. В этом исследовании новые экстракты омелы, содержащие как водорастворимые соединения, так и солюбилизированные тритерпеноиды, подвергались тестированию  на модели злокачественной меланомы у мышей против исключительно агрессивных клеток меланомы B16.F10. Добавление солюбилизированных тритерпеноидов усиливало противораковый эффект экстрактов омелы, что приводило к замедлению роста опухоли и увеличению длительности периода выживания мышей.

Гистологическое обследование подергавшихся лечению опухолей показывало некроз опухоли и повышение регуляции активной каспазы-3 в опухолевых клетках, а также значительное уменьшение CD31-положительных сосудов опухоли. Делается заключение, что добавление солюбилизированных тритерпеноидов омелы к обычным экстрактам омелы повышает эффективность лечения омелой и может представлять собой новый вариант лечения злокачественной меланомы.

Ключевые слова: Тритерпеноиды, олеаноловая кислота, меланома, омела, Viscum album L..

 Viscum album ингибирует рост клеток, миграцию и инвазию линий опухолевых клеток у детей – однако эффекты ограничены при концентрации, обнаруживаемой в сыворотке.

 T.J. Zuzak, M. Bornschein, K. Menke, H. Stephan, K. Pajtler, J. Eisenbraun, A. Schramm

 Цель: Viscum album (омела) является обычным вспомогательным лекарственным средством, применяемым в Германии для пациентов больных раком. Безопасность этого средства в настоящее время изучается  в рамках многоцентрового клинического испытания в области педиатрической онкологии, выполняемого в Германии, однако мало что известно относительно его эффективности против опухолевых клеток у детей. Для того, чтобы установить «сравнимый по пациентам» диапазон дозировок для экспериментов in vitro, мы использовали ранее опубликованные данные по концентрациям лектинов омелы в сыворотке, полученные для взрослых добровольцев после подкожного введения Viscum album (Abnobaviscum® Fraxini 20 мг).

Методы: Набор линий клеток раковых опухолей, взятых у нескольких пациентов педиатрического отделения, обрабатывали Viscum album (Abnobaviscum® Fraxini 20 мг) в ряде концентраций, измеряемых в образцах сыворотки. Изучалось влияние препарата in vitro на размножение, миграцию и инвазию этих клеток, а также на активацию путей апоптоза.

Результаты: Viscum album значительно ингибировал рост всех тестировавшихся линий опухолевых клеток детей, но не нормальных фибробластов. При инкубации образцов с Viscum album в «сравнимых по пациентам» дозировках наблюдалось ингибирование роста, миграции и инвазии клеток. Апоптоз индуцировался зависящим от дозы образом, однако не при тех концентрациях, которые обнаруживались в сыворотке пациентов, и осуществлялся он посредством как внутренних, так и внешних путей.

Заключение: Viscum album проявлял цитотоксичность in vitro по отношению к ряду линий опухолевых клеток, взятых у детей, давая тем самым основания для выполнения дальнейших исследований механизма действия этого средства против рака у детей. Ограниченная активация апоптоза препаратами Viscum album при концентрациях, обнаруживаемых в сыворотке пациентов, указывает на то, что может потребоваться новая оценка дозировочного режима, используемого при лечении препаратами Viscum album.

Ключевые слова: омела, педиатрическая онкология, ребенок.

 Два случая продолжительной регрессии первичной кожной В-клеточной лимфомы после лечения только препаратом омелы

 Orange, A. Lace, M. Fonseca, H.B. von Laue, S. Geider

 Введение: Экстракты Viscum album L. (VAE) широко применяются как компонент комплексного лечения рака, обычно в виде подкожного введения низких доз VAE – и было показано, что этот подход улучшает качество жизни пациентов, больных раком. При местном введении высоких доз в места злокачественных новообразований наблюдались продолжительные воспалительная реакция. Возможно, что дополнительное внутривенное введение препарата еще более усилит такую реакцию.

Описание случаев: Два пациента с первичной кожной В-клеточной лимфомой получали лечение только VAE (Abnobaviscum® Fraxini), синхронно применяя сочетание внутриопухолевого, подкожного и внутривенного введения препарата. Женщина в возрасте 51 года с многоцентровой первичной кожной В-клеточной лимфомой (T2bN1Mx, фолликулярная лимфома 1-й степени) в нижней части левой ноги, отказалась от рекомендованного ей систематического цитотоксического лечения и внешне-лучевой радиотерапии; обе опухоли лечили с использованием мультимодальной терапии VAE на протяжении 12,3 месяцев, начатой в 2008 году, применяя в среднем 1,05 г VAE в месяц, что составляет 0,5-0,8 мг лектинов омелы (ML) в месяц и 4,2-5,2 мг вискотоксинов (VTX) в месяц. У нее наблюдалась гипертермия всего тела, но никакого другого магистрального лечения она не получала.

Мужчина в возрасте 52 лет с рецидивирующей первичной кожной В-клеточной лимфомой маргинальной зоны в стадии 2А получал лечение VAE в течение 8 месяцев; через несколько недель после первичного хирургического удаления опухоли в переднелоктевой впадине в мае 2008 года появилась вторая опухоль на некотором расстоянии от первой. Он отказался от рекомендованного лечения  R-CVP (ритуксимаб, циклофосфамид, винкристин, преднизолон), и в августе 2008 г. начал получать мультимодальную терапию VAE; он получал в среднем 0,49 г VAE в месяц, что составляет 0,2-0,4 мг ML в месяц и 1,9-2,4 мг VTX в месяц. Онкологическое процесс обоих пациентов прореагировал на лечение соответствующим образом, и оба они находились в стадии ремиссии в момент обследования, проводившегося в 2011 году.

Заключения: Продолжительная регрессия опухолей наблюдалась у 2 пациентов, которые получали лечение дозами VAE, значительно большими, чем обычные, применяя сочетание различных путей введения препарата. Ни у одного из пациентов не наблюдалось нежелательных явлений, и ни один из них не получал противоракового лечения в какой-либо другой общепринятой форме.

Ключевые слова: Терапия омелой, кожная В-клеточная лимфома, внутривенный, высокотемпературный, индукция высокими дозами, иммунология опухоли, полная регрессия.

Обсервационное (Наблюдательное) исследование лечения лимфоцитной не-Ходжкиновской лимфомы (CLL) препаратами Viscum album - Helixor P или A

 

  1. Gutsch, S. Rieger, D. Schlodder
Поддержка сайта